Медицинская литература. Новинки

 

 

 

 

 

 

Влияние экстракта из растущей печени на пролиферацию гепатоцитов (экспериментальное исследование

Вы можете загрузить полный текст статьи в формате pdf

Исследованы механизмы репаративной регенерации печени в эксперименте. Показано, что внутрибрюшинное введение мышам тиоацетамида в дозе 250 мг/кг сопровождается развитием апоптоза в гепатоцитах, расположенных в центре печеночной дольки, с последующим восстановлением структуры за счет реактивных гепатоцитов. Реактивные гепатоциты отличаются от дифференцированных способностью к пролиферации, фагоцитозу апоптозных телец и отсутствием гликогена. Показано, что экстракт из растущей печени неонатального поросенка количественно усиливает активность фермента танкиразы, качественно не влияет на характер морфологических изменений и способствует снижению активности аминотрансфераз. При отсутствии сыворотки крови (FBS) экстракт способствует росту клеточных культур гепатоцитов (линия Huh7, первичная культура), эффект является дозозависимым. На рост культуры фибробластов мыши линии NIH 3Т3, клеток эмбриональной почки человека линии 293 и клеток HeLa экстракт не влияет. В условиях эксперимента под влиянием экстракта в гепатоцитах наблюдается активация сигнального пути Ras/MARK, что стимулирует пролиферацию клеток этого типа

Ключевые слова:
регенерация печени, культура клеток, экстракт растущей печени.

Литература:
1. LaBrecque D.R., Pesch L.A. Preparation and partial characterization of hepatic regenerative stimulator substance (SS) from rat
liver // J. Physiol. 1975. V. 248. P. 273–284.
2. LaBrecque D.R. Hepatic stimulator substance. Discovery, characteristics and mechanism of action // Dig. Dis. Sci. 1991. V. 36.
N 5. P. 669–673.
3. Hagiya M., Francavilla A., Polimeno L. et al. Cloning and
sequence analysis of the rat augmenter of liver regeneration
(ALR) gene: expression of biologically active recombinant ALR
and demonstration of tissue distribution // Proc. Natl. Acad. Sci.
USA. 1994. V. 91. № 17. P. 8142–8146.
4. Gatzidou E., Kouraklis G., Theocharis S. Insights on augmenter
of liver regeneration cloning and function // Wld J. Gastroenterol. 2006. V. 12. N 31. P. 4951–4958.
5. Klissenbauer M., Winters S., Heinlein U.A., Lisowsky T. Accumulation of the mitochondrial form of the sulphydryl oxidase
Erv1p/Alrp during the early stages of spermatogenesis // J. Exp.
Biol. 2002. V. 205. P. 1979–1986.
6. Wang G., Yang X., Zhang Y. et al. Identification and characterization of receptor for mammalian hepatopoietin that is homologous to yeast ERV1 // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. N 17.
P. 11469–11472.
7. Teng E.C., Todd L.R., Ribar T.J. et al. Gfer inhibits Jab1mediated degradation of p27kip1 to restrict proliferation of hematopoietic stem cells // Mol. Biol. Cell. 2011. V. 22. N 8. P. 1312–1320.
8. Chen X., Li Y., Wei K. et al. The potentiation role of hepatopoietin on activator protein1 is dependent on its sulfhydryl oxidase
activity // J. Biol. Chem. 2003. V. 278. N 49. P. 49022–49030.
9. Gandhi C.R., Murase N., Starzl T.E. Cholera toxinsensitive
GTPbinding proteincoupled activation of augmenter of liver
regeneration (ALR) receptor and its function in rat kupffer cells
// J. Cell. Physiol. 2010. V. 2. N 222. P. 365–373.
10. Li Y., Li M., Xing G.C. et al. Stimulation of the Mitogenactivated Protein Kinase Cascade and Tyrosine Phosphorylation of the
Epidermal Growth Factor Receptor by Hepatopoietin // J. Biol.
Chem. 2000. V. 275. P. 37 443–37 447.
11. Кочергин М.В. Восстановление печени под действием экстракта регенерирующей донорской печени в эксперименте //
Хирургия. 2009. Т. 7. С.55–61.
12. Гальперин Э.И., Дюжева Т.Г., Платонова Л.В. и др. Уменьшение повреждения печени при ее обширной резекции
и токсическом поражении (экспериментальное исследование) // Анн. хир. гепатол. 2008. Т. 13. №1. С. 51–55.
13. Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники.
Л.: Медицина, 1969.
14. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Под ред. Меньшикова В.А. М.: Медицина. 1987.
С. 186–190.
15. Chi N.W., Lodish H.F. Tankyrase is a golgiassociated mitogenactivated protein kinase substrate that interacts with IRAP in
GLUT4 vesicles // J. Biol. Chem. 2000. V. 275. N 49.
P. 38437–38444.
16. Sidorova N., Zavalishina L., Kurchashova S. et al. Immunohistochemical detection of tankyrase 2 in human breast tumors and normal renal tissue // Cell. Tissue Res. 2006. V. 323. N 1. P. 137–145.
17. Braeuning A., Ittrich C., Köhle C. et al. Differential gene expression in periportal and perivenous mouse hepatocytes // FEBS J.
2006. V. 273. N 22. P. 5051–5061.
18. Braeuning A., Schwarz M. BetaCatenin as a multilayer modulator of zonal cytochrome P450 expression in mouse liver // Biol.
Chem. 2010. V. 391. P. 139–148.
19. Giera S., Braeuning A., Köhle C. et al. Wnt/betacatenin signaling activates and determines hepatic zonal expression of glutathione Stransferases in mouse liver // Toxicol. Sci. 2010.
V. 115. N 1. P. 22–33.
20. Lewis R.J. Sax's Dangerous Properties of Industrial Materials.
9th ed. New York: Van Nostrand Reinhold, 1996. V. 1–3. P. 3155.
21. Lea M.A., Sasovetz D., Musella A., Morris H.P. Effects of hydroxyurea and 6mercaptopurine on growth and some aspects of car
bohydrate metabolism in regenerating and neoplastic liver //
Cancer Res. 1970. V. 30. N 7. P. 1994–1999.
22. More I.A. Biochemical and histological correlations of regeneration after experimental liver damage: significance of cirrhosis //
Br. J. Exp. Pathol. 1973. V. 54 N 4. P. 404–408.
23. Kalengayi M.M., Desmet V.J. Sequential histological and histochemical study of the rat liver after singledose aflatoxin B1
intoxication // Cancer Res. 1975. V. 35. N 10. P. 2836–2844.
24. Быкорез А.И., Пинчук В.Г. Экспериментальные опухоли
печени. Киев: Наукова думка, 1976. С. 107–130.
25. Rosa J.L., Ventura F., Carreras J., Bartrons R. Fructose 2,6bisphosphate and 6phosphofructo2kinase during liver regeneration // Biochem. J. 1990. V. 270. N 3. P. 645–649.
26. Lea M.A., Murphy P., Morris H.P. Glycogen metabolism in
regenerating liver and liver neoplasms // Cancer Res. 1972. V. 32.
N 1. P. 61–66.
27. Jackson L.N., Larson S.D., Silva S.R. et al. PI3K/Akt activation
is critical for early hepatic regeneration after partial hepatectomy // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. 2008.
V. 294. N 6. P. G1401–G1410.
28. Lade A.G., Monga S.P. Betacatenin signaling in hepatic development and progenitors: which way does the WNT blow? //
Dev. Dyn. 2011. V. 240. N3. P. 486–500.
29. Fitzhugh O.G., Nelson A.A. Liver Tumors in Rats Fed Thiourea or
Thioacetamide // Science. 1948. V. 108. N 2814. P. 626–628.
30. Shea S.M., Manseau E.J. Experimental toxic cirrhosis in the rat.
II. Kinetics of hepatocyte proliferation during intermittent thioacetamide intoxication // Am. J. Pathol. 1968. V. 52. N 1. P. 55–68.
31. Cantz T., Manns M.P., Ott M. Stem cells in liver regeneration and
therapy // Cell. Tissue Res. 2008. V. 331. P. 271–282.
32. Lysy P.A., Campard D., Smets F. et al. Stem cells for liver tissue
repair: Current knowledge and perspectives // Wld J. Gastroenterol. 2008. V. 14. N 6. P. 864–875.
33. Mishra L., Banker T., Murray J. et al. Liver Stem Cells and Hepatocellular Carcinoma // Hepatology. 2009. V. 49. N 1. P. 318–329.
34. Люндуп А.В., Онищенко Н.А., Крашенинников М.Е., Шагидулин М.Ю. О роли синусоидальных клеток печени и клеток
костного мозга в обеспечении регенераторной стратегии
здоровой и поврежденной печени // Вест. трансплантол.
и искусств. органов. 2010. Т. XII. С. 78–85.
35. Hwang S., Hong H.N., Kim H.S. et al. Hepatogenic differentiation of mesenchymal stem cells in a rat model of thioacetamideinduced liver cirrhosis // Cell. Biol. Internat. 2012. V. 36. N 3.
P. 279–288.
36. Theocharis S.E., Margeli A.P., Agapitos E.V. et al. Effect of
hepatic stimulator substance administration on tissue regeneration due to thioacetamideinduced liver injury in rats // Scand.
J. Gastroenterol. 1998. V. 33. N 6. P. 656–663.
37. Gribilas G., Zarros A., Zira A. et al. Involvement of hepatic stimulator substance in experimentally induced fibrosis and cirrhosis
in the rat // Dig. Dis. Sci. 2009. V. 54. N 11. P. 2367–2376.
38. Li F., Sun J.Y., Liu M. et al. Sterically stable liposomes improve
the therapeutic effect of hepatic stimulator substance on fulminant hepatic failure in rats // Biochem. Pharmacol. 2011. V. 82.
N 5. P. 556–565.
39. Thirunavukkarasu C., Wang L.F., Harvey S.A. et al. Augmenter
of liver regeneration: an important intracellular survival factor
for hepatocytes // J. Hepatol. 2008. V. 48. N 4. P. 578–588.

Influence of the Growing Liver Extract on the Hepatocyte Proliferation (experimental investigation)

Mechanisms of reparative regeneration of liver are studied in experiment. Intraperitoneal injection of thioacetamide, 250 mg/kg, is shown to initiate apoptosis of centrolobular hepatocytes. The following recovery of tissue structure is completed by reactive hepatocytes. Contrary to differentiated hepatocytes, the reactive hepatocytes are able to proliferate, to engulf the apoptotic bodies, and they had no glycogen deposits. An extract of growing liver of neonatal pig is shown to stimulate quantitatively an enzymatic activity of tankyrase, decrease an activity of aminotransferases, but it did not significantly affect development of toxic injury and regeneration in terms of morphology of tissue. After serum deprivation the extract stimulated growth of hepatocytes in culture (Huh7 cell line, primary culture), this effect was dosedependent. There was no effect of the extract on murine fibroblasts of NIH 3T3 line, human embryonic kidney cell line 293, and HeLa cells. Under experimental conditions the extract activated Ras/MAPK signaling pathway in hepatocytes, what led to stimulation of proliferation of cells of this type.

Keywords:
liver regeneration, cell culture, growing liver extract