Медицинская литература. Новинки

 

 

 

 

 

 

ИЗУЧЕНИЕ ЭПИТОПНОЙ СПЕЦИФИЧНОСТИ АУТОАНТИТЕЛ К ТИРЕОИДНОЙ ПЕРОКСИДАЗЕ ПРИ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Вы можете загрузить полный текст статьи в формате pdf

Проблема гетерогенности эпитопов антитиреопероксидазных аутоантител человека, выявляемых при болезни Грейвса и аутоиммунном тиреоидите, изучалась с использованием моноклональных антител к тиреоидной пероксидазе. Показано, что в конкуренции за центры связывания тиреоидной пероксидазы с аутоантителами из сыворотки крови пациентов с болезнью Грейвса и аутоиммунным тиреоидитом участвуют 8 моноклональных антител к эпитопам 1, 70, 82, 88, 2, 3, 77 и 79. Максимальное подавление связывания отмечено для аутоантител, направленных к конформационному эпитопу 3, при болезни Грейвса – 60,3 ± 12,7%, при аутоиммунном тиреоидите – 61,8 ± 32,2%. Причем степень подавления связывания не зависела от концентрации антител к тиреоидной пероксидазе в сыворотке крови пациентов с болезнью Грейвса в отличие от образцов сыворотки больных с аутоиммунным тиреоидитом. Аутоантитела в сыворотке больных аутоиммунным тиреоидитом подавляли связывание моноклональных антител к эпитопу 77 значительно сильнее, чем в сыворотке пациентов с болезнью Грейвса, – 36,3 ± 17,2 и 54,3 ± 9,6% соответственно (p ≤ 0,05). Полученные результаты свидетельствовали о специфичности аутоантител к определенным участкам молекулы тиреоидной пероксидазы и согласовывались с данными литературы. Можно предположить, что дальнейшее изучение конкурентных взаимодействий с аутоантителами других моноклональных антител, не включенных в проведенное исследование, а также расширение панели сывороток крови больных с различными формами патологии щитовидной железы, позволит выявить новые иммунодоминантные участки на молекуле тиреоидной пероксидазы, ответственные за формирование аутоантител при различных заболеваниях, и будет способствовать улучшению диагностики, контроля за состоянием функции щитовидной железы и проводимым лечением.

Ключевые слова:
аутоантитела, пероксидаза щитовидной железы, эпитопы, моноклональные антитела, аутоиммунный тиреоидит, гипотиреоз, болезнь Грейвса.

Литература:
1. Мельниченко Г.А. Аутоиммунный тиреоидит: клинические рекомендации российской ассоциации эндокринологов / Мат.
2-го Рос. тиреоидол. конгр. “Актуальные проблемы заболеваний щитовидной железы”, 20–21 ноября М., 2002. С. 5–18.
2. Мельниченко Г.А. Проблемы классификации и клинической
диагностики узлового зоба / Мат. 2го Рос. тиреоидол. конгр.
“Актуальные проблемы заболеваний щитовидной железы”,
20–21 ноября 2002 г. М., C. 43–49.
3. Шилин Д.Е. Актуальные вопросы лабораторной диагностики заболеваний щитовидной железы (современные рекомендации меж
дународных организаций) // Лаборатория. 2002. №3. С. 22–25.
4. Трошина Е.А. К вопросу о недостатке и избытке йода в организме человека // Клин. экпер. тиреидол. 2010. Т. 6. №4. С. 9–16.
5. Weetman A.P. The potential immunological role of the thyroid cell
in autoimmune thyroid disease // Thyroid. 1994. V. 4(4).
P. 493–499.
6. Weetman A.P., Black C.M., Cohen S.B. et al. Affinity purification of
IgG subclasses and the distribution of thyroid autoantibody reactivity in
Hashimoto's thyroiditis // Scand. J. Immunol. 1989. V. 30. P. 73–82.
7. Weetman A.P. The role of T lymphocytes in thyroidassociated
ophthalmopathy // Autoimmun. 1992. V. 13(1). P. 69–73.
8. Weetman A.P., Fung H.Y.M., Richards C.J., McGregor A.M. IgG
subclass distribution and relative functional affinity of thyroid
microsomal antibodies in postpartum thyroiditis // Eur. J. Clin.
Invest. 1990. V. 20. P. 133–136.
9. Tandon N., Freeman M., Weetman A.P. T cell responses to synthetic thyroid peroxidase peptides in autoimmune thyroid disease // Clin. Exp. Immunol. 1991. V. 86. P. 56–60.
10. Tandon N., Yan S.L., Morgan B.P., Weetman A.P. Expression and
function of multiple regulators of complement activation in
autoimmune thyroid disease // Immunol. 1994. V. 81. P. 643–647.
11. Nagayama Y., Seto P., Rapoport B. Characterization, by molecular
cloning, of smaller forms of thyroid peroxidase messenger ribonucleic acid in human thyroid cells as alternatively spliced transcripts // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1990. V. 71(2). P. 384–390.
12. Portolano S., McLachlan S.M., Rapoport B. High affinity, thyroidspecific human autoantibodies displayed on the surface of filamentous phage use V genes similar to other autoantibodies. // J.
Immunol. 1993. V. 151(5). P. 2839–2851.
13. Portolano S., Chazenbalk G.D., Seto P. et al. Recognition by
recombinant autoimmune thyroid diseasederived Fab fragments
of a dominant conformational epitope on human thyroid peroxidase // J. Clin. Invest. 1992. V. 90(3). P. 720–726.
14. Volpe R. Blymphocytes in autoimmune thyroid diseases
(AITD) // Rev. Endocr. Metab. Disord. 2000. V. 1 (1–2).
P. 79–86.
15. Ruf J., Carayon P. Structural and functional aspects of thyroid
peroxidase // Arch. Biochem. Biophys. 2006. V. 445. P. 269–277.
16. Ludgate M., Costagliola S.,Vassart G. Animal models of Graves'
disease. In Graves' disease: pathogenesis and treatment / Ed. B.
Rapoport, S.M. McLachlan. Massachusetts: Kluwer Acad.
Publish. Norwell, 2000. P. 127–138.
17. Jeong H.J., Lee M.K., Choi I.J., Lee Y.B. Disribution of lymphocytic subpopulations infiltrated in thyroid glands of Graves disease // Yonsei Med. J. 1989. V. 30(2). P .118–124.
18. Paschke R., Vogg M., Swillens S., Usadel K.H. Correlation of
microsomal antibodies with the intensity of the intrathyroidal
autoimmune process in Graves' disease // J. Clin. Endocr. Metab.
1993. V. 77 (4). P. 939–943.
19. Кандрор В.И., Крюкова И.О., Крайнова С.И. Антитиреоидные
антитела и аутоимунные заболевания // Пробл. эндокринол.
1997. Т. 43. №3. С. 28–30.
20. Bermann M., Magee M., Koenig R.G. et al. Differential autoantibody responses to thyroid peroxidase in patients with Graves' disease and Hashimoto's thyroiditis // J. Clin. Endocrinol. Metab.
1993. V. 77 (4). P. 1098–1101.
21. Ruf J., Toubert M.E., Czarnocka B. et al. Relationship between
immunomogical structure and biochemical properties of human
thyroid peroxidase // Endocr. 1989. V. 125. P. 1211–1218.
22. Bossowski A., StasiakBarmuta A., Czarnocka B. et al. Applikation
of mouse monoclonal antibodies for identifications of antigen
regions of human thyroid peroxidase in adolescents with Graves
disease and nontoxic multinodular goiter by flow cytometry //
Autoimmun. 2005. V 38 (8). P. 605–611.
23. Ruf J., Czarnocka B., De Micco C., Duttoit C., Ferrand M., Carayon
P. Thyroid peroxidase is the organspecific “microsomal”
autoantigen involved in thyroid autoimmunity. // Acta Endocr.
Suppl. (Copenh).1987. V 281. P. 49–56.
24. Banga J.P., Mirakian R., Hammond L. et al. Characterization of
monoclonal antibodies directed towards the microsomal/microvillar thyroid autoantigen recognized by Hashimoto autoatibodies //
Clin. Exp. Immunol. 1986. V. 64 (30). P. 544–554.
25. Кузьмина Н.С., Яковлева И.В., Свиридов В.В. и др. Моноклональные антитела к человеческой пероксидазе щитовидной
железы // Биотехнология. 2005. №1. С. 51–57.
26. Зубков А.В., Яковлева И.В., Свиридов В.В. и др. Моноклональные антитела в исследовании структуры тиреопероксидазы –
ведущего аутоантигена щитовидной железы // Физиология и
патология иммунной системы. 2005. Т 9. №8. С. 25–30.
27. Зубков А.В. Изучение эпитопной структуры пероксидазы щитовидной железы человека: Автореф. дис. … канд. мед. наук. М., 2006.
28. Кузьмина Н.С., Кузнецова Г.И., Яковлева И.В. и др. Разработка
иммуноферментного количественного метода определения
антител к пероксидазе щитовидной железы // Аллергия, астма и клиническая иммунология. 1999. №9. С. 145–147.

Evaluation of epitopes specificity of antibodies to thyroid peroxidase in autoimmune thyroid disorders

The problem of the human antithyroid peroxidase autoantibodies epitopes heterogeneity diagnosed in case of Graves' disease and Hashimoto's thyroiditis has been researched using monoclonal antibodies to thyroid peroxidase. It was shown, that in the competition for the binding sites of thyroid peroxidase and autoantibodies taken from patients with Graves' disease and Hashimoto's thyroiditis sera participate 8 mAb to epitopes 1, 70, 82, 88, 2, 3, 77 и 79. The maxima of the binding inhibition has been marked for the conformation epitope mAb 3: in case of Graves' disease it amounts to 60.3 ± 12.7%, in case of Hashimoto's thyroiditis – 61.8 ± 32.2%. Moreover the level of the binding inhibition did not depend on the concentration of Ab to thyroid peroxidase in the sera of patient with Graves' as opposed to the serum of patients with Hashimoto's thyroiditis. Autoantibodies in the serum of the patientswith Hashimoto's thyroiditis inhibited the binding of mAb to epitope 77 much more effectively, than in the serum of the patients with: 36.3 ± 17.2 and 54.3 ± 9.6% (p ≤ 0.05). The obtained results represented the specific reaction of the autoantibodies to the certain thyroid peroxidase molecular patterns which corresponds to the literature data. It is possible to assume that the further research of the competitive interactions with other autoantibodies to monoclonal antibodies, not included in this trial, and widening of the different thyroid diseased patients' serum palette can expose new immunodominant thyroid peroxidase molecular patterns, forming antibodies for different diseases, and enable the development of diagnostics and control of the thyroid functions and applied therapy

Keywords:
autoantibodies, thyroid peroxidase, epitopes, monoclonal antibodies, Hashimoto's thyroiditis, Graves' disease.