Медицинская литература. Новинки

 

 

 

 

 

 

Влияние биологической комбинации (экстракт из растущей печени) на культуры клеток различного происхождения

Вы можете загрузить полный текст статьи в формате pdf

Цель. Изучить влияние экстракта, полученного из растущей печени, на жизнеспособность и пролиферативную активность различных типов клеток в культуре. Материал и методы. Биологическая комбинация представляет собой экстракт, полученный из растущей печени по разработанной оригинальной методике. Исследовано влияние экстракта на следующие клеточные линии: гепатокарциному Huh7, мышиные L-фибробласты, мезенхимальные стволовые клетки костного мозга мыши. Жизнеспособность и пролиферативную активность оценивали по окрашиванию клеток трипановым синим и визуальному подсчету клеток при световой фазовоконтрастной микроскопии. Результаты. Биологическая комбинация, полученная из растущей печени неонатального поросенка, дозозависимо защищает клетки гепатоцитарного происхождения от депривации фетальной сыворотки, в присутствии сыворотки стимулирует рост клеток. Высокая концентрация экстракта не приводит к ростовому аресту линии гепатоцитарного происхождения. В то же время экстракт является цитостатиком (или цитотоксином) для мышиных L-фибробластов. Выявлен ограниченный защитный эффект экстракта относительно депривации сыворотки при действии на стволовые клетки из костного мозга мыши. Заключение. Результаты исследования позволяют рассматривать выделенный экстракт в качестве возможного регулятора репаративной регенерации печени, оказывающего защитный и/или стимулирующий эффект на клетки гепатоцитарного происхождения (Huh7), мезенхимальные стволовые клетки костного мозга мыши и цитостатический эффект на основные продуценты фиброзной ткани - фибробласты. Это является основанием для проведения дальнейших исследований.

Ключевые слова:
мезенхимальные стволовыеклетки, фибробласты, бессывороточная среда, стимуляторрегенерации, регенерация печени, ростовой арест, mesenchymal stem cells, fibroblasts, serum-free medium, regeneration stimulator, hepatic regeneration, growing arrest

Литература:
1.Kim R.D., Kim J.S., Watanabe G., Mohuczy D., Behrns K.E. Liver regeneration and the atrophy-hypertrophy complex. Semin. Intervent. Radiol. 2008; 25 (2): 92-103. DOI: 10.1055/s-2008-1076679.
2.Furst G., Schulte am Esch J., Poll L.W., Hosch S.B., Fritz L.B., Klein M., Godehardt E., Krieg A., Wecker B., Stoldt V., Stockschlader M., Eisenberger C.F., Modder U., Knoefel W.T. Portal vein embolization and autologous CD133+ bone marrow stem cells for liver regeneration: initial experience. Radiology. 2007; 243 (1): 171-179. DOI: 10.1148/radiol.2431060625.
3.Serenari M., Cescon M., Cucchetti A., Pinna A.D. Liver function impairment in liver transplantation and after extended hepatectomy. World J. Gastroenterol. 2013; 19 (44): 7922-7929. DOI: 10.3748/wjg.v19.i44.7922.
4.Moris D., Vernadakis S., Papalampros A., Vailas M., Dimitrokallis N., Petrou A., Dimitroulis D. Mechanistic insights of rapid liver regeneration after associating liver partition and portal vein ligation for stage hepatectomy. World J. Gastroenterol. 2016; 22 (33): 7613-7624. DOI: 10.3748/wjg.v22.i33.7613.
5.LaBrecque D.R., Pesch L.A. Preparation and partial characterization of hepatic regenerative stimulator substance (SS) from rat liver. J. Physiol. 1975; 248 (2): 273-284. DOI: 10.1113/jphysiol.1975.sp010973.
6.Gal’perin E.I., Platonova L.V., Shono N.I., Chevokin A.Y., Sakevarashvili G.R., Abakumova O.Y., Tsvetkova T.A., Kondakova L.I. Thermostable hepatocyte growth factor and energy metabolism in rats after partial hepatectomy. Bull. Exp. Biol. Med. 1999; 127 (1): 47-49. DOI: 10.1007/BF02432798.
7.Гальперин Э.И., Атауллаханов Р.И., Дюжева Т.Г., Платонова Л.В., Мельникова Т.М., Монаков М.Ю., Дудченко А.М., Люндуп А.В., Клабуков И.Д. Возможности биологической комбинации, полученной из растущей печени, для ее восстановления при токсическом повреждении (экспериментальное исследование). Биомедицинская химия. 2017; 63 (5): 440-446. DOI: 10.18097/PBMC20176305440.
8.Гальперин Э.И., Дюжева Т.Г., Абакумова О.Ю., Платонова Л.В. Способ получения вещества, стимулирующего регенерацию поврежденной печени. Патент РФ на изобретение №2548750 /17.02.2014. Бюл. №11-2015.
9.Rasulov M.F., Vasilchenkov A.V., Onishchenko N.A., Krasheninnikov M.E., Kravchenko V.I., Gorshenin T.L., Pidtsan R.E., Potapov I.V. First experience in the use of bone marrow mesenchymal stem cells for the treatment of a patient with deep skin burns. Bull. Exp. Biol. Med. 2005; 139 (1): 141-144. DOI: 10.1007/s10517-005-0232-3.
10.Куимов А.Н., Жожикашвили А.С., Никифорова А.И., Манских В.Н., Платонова Л.В., Шоно Н.И., Савицкая Е.Е., Батин М.А., Дюжева Т.Г. Влияние экстракта из растущей печени на пролиферацию гепатоцитов (экспериментальное исследование). Анналы хирургической гепатологии. 2012; 17 (4): 66-74.
11.Chen J., Larochelle A., Fricker S., Bridger G., Dunbar C.E., Abkowitz J.L. Mobilization as a preparative regimen for hematopoietic stem cell transplantation. Blood. 2006; 107 (9): 3764-3771.
12.Tanaka M., Miyajima A. Liver regeneration and fibrosis after inflammation. Inflamm. Regen. 2016; 36: 19. DOI: 10.1186/s41232-016-0025-2.
13.Michalopoulos G.K. Liver regeneration after partial hepatectomy. Critical analysis of mechanistic dilemmas. Am. J. Pathol. 2010; 176 (1): 2-13. DOI: 10.2353/ajpath.2010.090675.
14.Kiess W., Gallaher B. Hormonal control of programmed cell death/apoptosis. Eur. J. Endocrinol. 1998; 138 (5): 482-491.
15.Yi X., Song M., Yuan Y., Zhang X., Chen W., Li J., Tong M., Liu G., You S., Kong X. Hepatic stimulator substance alleviates toxin-induced and immune-mediated liver injury and fibrosis in rats. Dig. Dis. Sci. 2012; 57 (8): 2079-2087. DOI: 10.1007/s10620-012-2168-6.
16.Li F., Ma N., Zhao R., Wu G., Zhang Y., Qiao Y., Han D., Xu Y., Xiang Y., Yan B., Jin J., Lv G., Wang L., Xu C., Gao X., Luo S. Overexpression of miR-483-5p/3p cooperate to inhibit mouse liver fibrosis by suppressing the TGF-? stimulated HSCs in transgenic mice. J. Cell. Mol. Med. 2014; 18 (6): 966-974. DOI: 10.1111/jcmm.12293.
17.Kumar S., Wang J., Rani R., Gandhi C.R. Hepatic deficiency of augmenter of liver regeneration exacerbates alcohol-induced liver injury and promotes fibrosis in mice. PLoS One. 2016; 11 (1): e0147864. DOI: 10.1371/journal.pone.0147864.
18.Jiang S.J., Li W., An W. Adenoviral gene transfer of hepatic stimulator substance confers resistance against hepatic ischemiareperfusion injury by improving mitochondrial function. Hum. Gene Ther. 2013; 24 (4): 443-456. DOI: 10.1089/hum.2012.219.
19.Zhang J., Li Y., Jiang S., Yu H., An W. Enhanced endoplasmic reticulum SERCA activity by overexpression of hepatic stimulator substance gene prevents hepatic cells from ER stressinduced apoptosis. Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 2014; 306 (3): 279-290. DOI: 10.1152/ajpcell.00117.2013.

Effect of Growing Liver Biological Set on Various Cellular Cultures

Aim. To analyze the effect of growing liver biological set on viability and proliferative activity of various cellular cultures in vitro. Material and Methods. The biological combination is an extract from the growing liver obtained by using of original technique. We have assessed extract’s effect on the following cellular lines: hepatic carcinoma Huh7, L-fibroblasts of mice, murine bone marrow mesenchymal stem cells. Viability and proliferative activity were assessed by staining the cells with trypan blue and visual counting of cells under phase contrast microscopy. Result. Biological combination from neonatal piglet’s growing liver dose-dependently protects hepatocyte-like cells from deprivation of fetal serum and stimulates cellular growth in presence of serum. High concentrations of HRS do not lead to growth arrest of the Huh7 cells. At the same time, it is a cytostatic (or cytotoxic) for murine L-fibroblasts. Limited protective effect of the combination on the deprivation of serum when exposed to bone marrow stem cells was revealed. Conclusion. Our data show that the extract may be considered as an important regulator of reparative regeneration of liver with protective and/or stimulating effect on mesenchymal stem and hepatic-like cells and cytostatic effect on fibroblasts. So, further trials are necessary.

Keywords:
мезенхимальные стволовыеклетки, фибробласты, бессывороточная среда, стимуляторрегенерации, регенерация печени, ростовой арест, mesenchymal stem cells, fibroblasts, serum-free medium, regeneration stimulator, hepatic regeneration, growing arrest